微生物分析の 4 つの主な方法には、増殖測定、微生物計数、生理学的指標および塗抹顕微鏡検査が含まれます。
成長測定
体積測定:一定体積の培地中の菌糸量を測定することで微生物の増殖状態を反映します。この方法は簡単で高速ですが、誤差が大きくなります。
乾燥重量法:微生物の乾燥重量は、遠心分離または濾過によって測定されます。この方法はより煩雑であり、微生物産物が乾燥酵母や飼料などの細菌細胞である場合に通常使用されます。
濁度測定:紫外分光光度計により特定の波長における吸光度の値を測定し、微生物の増殖状態を判定します。この方法は主に発酵産業における細菌の増殖モニタリングに使用されます。
菌糸体長測定:糸状菌や一部の放線菌については、培地上で一定期間内に成長する菌糸の長さを測定することができます。
微生物計数法
「血球計数法」: シンプル、直感的、迅速ですが、単細胞微生物または糸状微生物によって生成される胞子の数を数えるのにのみ適しており、結果には死んだ細菌と生きた細菌が含まれます23。
染色カウント方法: ニュートラルレッド、トリパンブルー、メチルブルーなどの色素を使用して、死細胞と生細胞を区別します。
液体希釈法: 未知の細菌サンプルを 10 倍段階希釈し、培養後に各希釈で増殖した試験管の数を記録し、サンプルの希釈倍数に基づいて生細菌含有量を計算します。この方法はより面倒ですが、生きた細菌の数を計算できます。
平板コロニー計数法:希釈菌液を固体培地に塗布し、培養後の元の菌液中の菌数を算出する。この方法では生きた菌の情報が得られますが、操作が煩雑であり、ある程度の培養時間も必要となります。
生理学的指標法
窒素含有量の測定: ほとんどの細菌の窒素含有量は乾燥重量の 12.5% です。窒素含有量を測定することで、微生物の増殖状態を間接的に反映できます。
炭素含有量の測定: K2Cr2O7 溶液を使用して特定の波長での吸光度を測定し、標準曲線を描いて成長量を計算します。
還元糖定量法:還元糖の量を測定することで微生物の増殖状態を反映し、大規模な工業的発酵生産でよく使用されます。
その他の生理学的物質の測定: 核酸、ATP、その他の内容物、酸生成、ガス生成、酸素消費、熱生成、その他の指標が含まれます。
塗抹顕微鏡検査
塗抹顕微鏡検査は、細菌、細胞学、酵素細菌、ミクロフィラリア、コレステロール結晶を検査する方法です。塗抹標本を作製し、顕微鏡で観察することで、微生物の形態や構造を直感的に理解することができます
